Bremelanotide(liên kết:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/bremelanotide-powder-cas-189691-06-3.html) là một loại hormone polypeptide tổng hợp có cấu trúc tương tự như leptin, tyrosine và melanin da tồn tại tự nhiên trong cơ thể con người. Là một loại thuốc mới, Bremelanotide có chức năng điều hòa và thường được sử dụng trong điều trị rối loạn cương dương và ham muốn tình dục thấp. Các kịch bản sử dụng trong cuộc sống hàng ngày ngày càng trở nên phong phú hơn. Với sự nghiên cứu chuyên sâu của mọi người về ông, người ta đã phát hiện ra nhiều loại phương pháp tổng hợp của ông, sẽ được phân tích từng phương pháp một dưới đây.
1. Tổng hợp từ L-tyrosine:
Trong phương pháp tổng hợp ban đầu, cấu trúc của Bremelanotide thu được bằng cách làm biến dạng L-tyrosine. Đầu tiên, L-tyrosine được chuyển đổi thành dipeptidyl-L-tyrosine (Boc-Tyr(OCO)2-OH) với sự có mặt của axit hydrofluoric, trong đó Boc đại diện cho nhóm succinimidomethyl (t -butoxycarbonyl). Tiếp theo, thêm rượu benzyl (PhCH2OH), 1-(3-diethylaminopropoxy)-2-(2-methazolyl)ethane (EDC) và N-hydroxybutanediol vào thuốc thử tetrahydrofuran (THF) như imide (HOBt) có thể kết hợp dipeptidyl-L-tyrosine với pseudopeptide alanine (Phe-Aib-Aib-Lys(Ac)-Gly-Lys(Ac)-Aib-Leu-NH2) được tổng hợp thành Bremelanotide.
(1) Chuyển đổi L-tyrosine thành dipeptidyl-L-tyrosine:
Đầu tiên, hòa tan L-tyrosine trong nước và thêm lượng axit hydrofluoric thích hợp. Thông thường, nồng độ L-tyrosine là 1M và lượng axit hydrofluoric là 5-10%. Hỗn hợp được phép đứng ở 0-4 độ trong 1 giờ và sau đó được làm nguội.
Tiếp theo, phức hợp axit L-tyrosine-hydrofluoric thu được được thêm từng giọt vào tetrahydrofuran. Đồng thời, một lượng thuốc thử phản ứng thích hợp như rượu benzyl, EDC và HOBt đã được thêm vào tetrahydrofuran. Sau khi khuấy trong 2 giờ, có thể thu được dipeptidyl-L-tyrosine (Boc-Tyr(OCO)2-OH).
(2) Phản ứng của dipeptidyl-L-tyrosine với pseudopeptide alanine:
Hòa tan dipeptidyl-L-tyrosine thu được trong N,N-dimethylformamide (DMF) và thêm alanine pseudopeptide. Các điều kiện phản ứng bao gồm nhiệt độ, thời gian phản ứng và nồng độ chất phản ứng, v.v. Những yếu tố này sẽ ảnh hưởng đến năng suất và độ tinh khiết của sản phẩm. Ở nồng độ 225 g/L, tỷ lệ Boc-Tyr(OCO)2-OH so với pseudopeptide alanine là 1:30.
Sau khi khuấy và để yên trong -N,N-dimethylformamide trong 24 giờ, đổ dung dịch phản ứng vào nước đá và kết tủa bằng dung dịch aldehyd có tính axit. Kết quả là sản phẩm cuối cùng của Bremelanotide.
Phương pháp tổng hợp chủ yếu có những ưu điểm sau: độ tinh khiết của sản phẩm cao và quy trình sản xuất đơn giản. Nhưng phương pháp này cũng có một số nhược điểm như tốn thời gian, chi phí cao, v.v.
2. Tổng hợp pha rắn:
Tổng hợp pha rắn hiện là một trong những phương pháp tổng hợp được sử dụng phổ biến nhất cho Bremelanotide và nó cũng là phương pháp tổng hợp chính trong lĩnh vực tổng hợp peptide. Trong phương pháp pha rắn, chuỗi polypeptide được tạo thành bằng cách bổ sung liên tiếp các đơn vị axit amin. Đầu tiên, đơn vị axit amin thứ nhất được biến đổi thành nhóm bảo vệ N hạn chế về mặt không gian và không thể phân hủy (như Fmoc), sau đó được gắn vào môi trường xốp. Tiếp theo, bằng cách đưa nhóm bảo vệ axit acrylic, phản ứng acyl hóa và các bước khác, mỗi đơn vị axit amin được thêm vào môi trường xốp và chuỗi polypeptide hoàn chỉnh dần dần được xây dựng. Cuối cùng, trong các bước loại bỏ nhóm bảo vệ N, khử nitrat, v.v., có thể điều chế được chuỗi polypeptide Bremelanotide với trình tự cụ thể.
Phương pháp tổng hợp pha rắn chủ yếu có những ưu điểm sau: hiệu quả cao và tỷ lệ sử dụng nguyên liệu thô cao. Nhưng phương pháp tổng hợp này cũng có một số nhược điểm, chẳng hạn như trong quá trình sản xuất cần có nhiều bước sấy và giặt, các bước này sẽ dẫn đến chất lượng sản phẩm bị giảm sút.
3. Tổng hợp pha lỏng:
Tổng hợp pha lỏng là một phương pháp tổng hợp khác của Bremelanotide, được thực hiện thông qua hệ thống phản ứng lỏng. Các bước chính của phương pháp tổng hợp bao gồm sàng lọc nguyên liệu thô, thiết kế phân tử thuốc, lựa chọn lộ trình tổng hợp, phản ứng, tinh chế và những thứ tương tự. So với phương pháp tổng hợp pha rắn, phương pháp tổng hợp pha lỏng có thể thu được Bremelanotide với độ tinh khiết và hoạt tính sinh học cao hơn. Trong phương pháp tổng hợp pha lỏng, các thuốc thử phản ứng thường được sử dụng là dihydroxyethyl mercaptan (EDT), chất ethoxycarbonylating (EEDQ), thioacetyl clorua, v.v..
Phương pháp tổng hợp pha lỏng chủ yếu có những ưu điểm sau: vận hành đơn giản và độ tinh khiết của sản phẩm cao. Tuy nhiên, phương pháp tổng hợp này cũng có một số nhược điểm như thời gian tổng hợp dài hơn và giá thành cao hơn.
4. Tổng hợp lý hóa:
Trong phương pháp tổng hợp lý hóa, Bremelanotide được tổng hợp bằng phương pháp vật lý và hóa học. Phương pháp này chủ yếu có hai cách tiếp cận khác nhau: một là thực hiện quá trình tổng hợp Bremelanotide thông qua hoạt động lặp lại chuyển đổi pha rắn-lỏng; cách khác là thúc đẩy quá trình tự lắp ráp và trùng hợp các chuỗi polypeptide thông qua quá trình nén vật lý và cơ học, từ đó tổng hợp Bremelanotide.
Cơ chế phản ứng:
Quá trình tổng hợp Bremelanotide chủ yếu bằng cách chuyển L-tyrosine thành L-phenolic acylate, sau đó tổng hợp L-phenolic acylate và pseudopeptide, và cuối cùng thu được sản phẩm. Cơ chế của phản ứng như sau:
(1) Chuyển hóa L-tyrosine thành L-phenol acylate:
L-tyrosine phản ứng với natri azide trong dung dịch THF để tạo ra L-phenol acylate. Natri azide sẽ chuyển nhóm hydroxyl trong tyrosine thành nhóm azide, sau đó xử lý bằng axit sẽ chuyển nhóm azide thành acyl phenolic.
(2) L-phenol acylate được chuyển thành axit clorua:
L-phenolic acylate phản ứng với acetyl clorua trong THF để tạo ra axit clorua. Lượng TBHS hấp thụ gấp 5 lần lượng HCl được tạo ra. Axit clorua là chất trung gian phản ứng cần thiết cho các phản ứng tiếp theo.
(3) Tổng hợp axit clorua và pseudopeptide:
Axit clorua trung gian phản ứng với pseudopeptide trong DMF để tạo ra chuỗi polypeptide của Bremelanotide. Điều xảy ra ở bước này là phản ứng ngưng tụ anhydrit, trong đó HOBt là chất xúc tác.
(4) Tinh chế và phân tích sản phẩm:
Sản phẩm cuối cùng cũng cần được tinh chế và phân tích để đảm bảo độ tinh khiết và chất lượng của hợp chất.
Phương pháp tổng hợp hóa lý chủ yếu có những ưu điểm sau: vận hành đơn giản và thời gian chuẩn bị ngắn. Tuy nhiên, phương pháp tổng hợp này cũng có một số nhược điểm như độ tinh khiết của sản phẩm thấp và sản phẩm chưa đa dạng.
Tóm lại, các phương pháp tổng hợp Bremelanotide rất đa dạng và linh hoạt, việc lựa chọn phụ thuộc vào nhiều yếu tố như điều kiện phản ứng, chi phí tổng hợp và thời gian phản ứng, v.v. Bất kể phương pháp nào được sử dụng, điều kiện phản ứng ổn định và sản phẩm có độ tinh khiết cao là ưu tiên hàng đầu. chìa khóa để tổng hợp thành công Bremelanotide.