Icatibant

Lựa chọn chất mang nhựa
Nhựa Wang hoặc nhựa HMP thường được sử dụng có chứa các nhóm hydroxyl hoạt động trên bề mặt của nó, có thể hình thành liên kết este với các nhóm cacboxyl của axit amin để đạt được sự cố định pha rắn của chuỗi polypeptide. Ví dụ: một bằng sáng chế nào đó sử dụng nhựa Fmoc Arg (NO ₂) - Wang với mức độ thay thế 0,8 mmol/g làm chất mang ban đầu và cố định axit amin đầu tiên (Fmoc Arg (NO ₂) - OH) trên nhựa thông qua phản ứng este hóa.

Loại bỏ nhóm bảo vệ Fmoc
Xử lý nhựa bằng dung dịch piperidine/DMF 20% để loại bỏ nhóm bảo vệ Fmoc ở đầu N-của axit amin và làm lộ ra các nhóm amin hoạt động. Ví dụ, trong quá trình tổng hợp, cần đảm bảo loại bỏ hoàn toàn nhóm Fmoc qua 10 bước “khuấy phản ứng hòa tan” lặp đi lặp lại.

Liên kết axit amin từng cái một
Liên hợp các axit amin được bảo vệ theo trình tự, thường sử dụng hệ thống HBTU/HOBt/DIPEA làm thuốc thử ghép nối. Ví dụ, trong quá trình tổng hợp nhựa etibant,dễ tínhcần phải ghép tuần tự Fmoc-Oic OH, Fmoc-D-Tic-OH, Fmoc-Ser (tBu) - OH, v.v. Sau mỗi lần ghép, điểm cuối phản ứng cần được phát hiện bằng phương pháp xeton indene để đảm bảo hiệu suất ghép lớn hơn 99%.

Nứt và mất bảo vệ
Sau khi hoàn thành tất cả các liên hợp axit amin, peptit được tách khỏi nhựa bằng hỗn hợp axit trifluoroacetic (TFA) và dung dịch đệm ly giải (TFA/phenol/TIS/nước=95:2,5:0,5), đồng thời loại bỏ các nhóm bảo vệ chuỗi bên (chẳng hạn như tBu, Pbf, v.v.). Ví dụ, trong một phương pháp nhất định, 130,1g nhựa Wang etibant được phản ứng ở 15 độ trong 3 giờ và sau khi crackinh, thu được 80,2g sản phẩm thô với độ tinh khiết 55,0%.

Giới thiệu D{0}}Tic
D-Tic (octahydroindole-2-axit cacboxylic) là một axit amin vòng cứng và việc đưa nó vào đòi hỏi các điều kiện ghép đặc biệt. Ví dụ: một bằng sáng chế nhất định sử dụng các đoạn dipeptide Fmoc Ser (tBu) - D-Tic-OH để ghép, làm giảm đáng kể việc tạo ra các tạp chất peptide bị thiếu (chẳng hạn như des-D-Tic-etibant).

Điều khiển lập thể của Thi
Thi (thiazole alanine) chứa các nguyên tử lưu huỳnh và dễ bị phân biệt chủng tộc. Bằng cách tối ưu hóa các thuốc thử ghép nối (chẳng hạn như DIC/HOBt) và nhiệt độ phản ứng (nhiệt độ phòng), tạp chất chủng tộc (chẳng hạn như D-Thi-ertiban) có thể được kiểm soát dưới 0,03%.

Bảo vệ chuỗi bên Arg
Chuỗi bên của arginine chứa các nhóm guanidine và cần được bảo vệ bằng nhóm Pbf hoặc NO ₂. Ví dụ: trong quá trình tổng hợp, sử dụng Boc-D-Arg (NO ₂) - OPvp làm axit amin cuối cùng có thể làm giảm việc tạo ra các tạp chất peptide bị thiếu (chẳng hạn như des-D-Arg-ertiban).

Chiến lược phân đoạn dipeptide
Việc tổng hợp trước các đoạn dipeptide (chẳng hạn như Fmoc Arg (NO ₂) - Pro OH, Fmoc Ser (tBu) - D-Tic-OH) từ hai axit amin liền kề có thể làm giảm các tạp chất peptide bị thiếu trong bước ghép nối. Ví dụ, một phương pháp nhất định làm giảm tổng hàm lượng tạp chất từ ​​8,2% xuống 1,5% bằng cách sử dụng các đoạn dipeptide.

Tối ưu hóa điều kiện nứt
Việc điều chỉnh thành phần của dung dịch Cracking (chẳng hạn như tăng tỷ lệ phenol) và thời gian phản ứng có thể cải thiện độ tinh khiết của sản phẩm thô. Ví dụ: một bằng sáng chế nào đó sử dụng dung dịch Cracking với TFA/phenol/TIS/nước=92.5:2.5:2.5 để tăng độ tinh khiết của sản phẩm thô từ 55,0% lên 81,7%.

Đổi mới trong quá trình thanh lọc
Tinh chế bằng cách sử dụng-sắc ký pha ngược hai bước: bước đầu tiên sử dụng dung dịch rửa giải gradient acetonitril TFA/nước 0,1% và bước thứ hai sử dụng dung dịch rửa giải gradient acetonitril trong dung dịch amoni axetat 0,15%, dẫn đến độ tinh khiết lớn hơn 99,5% của etibant. Ví dụ: một phương pháp nhất định sẽ tăng hiệu suất từ ​​55,2% lên 75% thông qua quá trình tinh chế hai{7}}bước.

Thay thế và tái chế nhựa
Việc phát triển các chất mang nhựa có chi phí thấp (chẳng hạn như copolyme polystyrene polyethylene glycol) có thể giảm chi phí nguyên liệu thô. Ví dụ: một bằng sáng chế nào đó sử dụng nhựa có thể tái chế, giúp giảm 30% chi phí cho một lô.

Công nghệ tổng hợp dòng chảy liên tục
Giới thiệu lò phản ứng vi mô hoặc lò phản ứng giường cố định để đạt được khả năng sản xuất liên kết axit amin liên tục và rút ngắn chu trình tổng hợp. Ví dụ, một doanh nghiệp nào đó đã rút ngắn thời gian tổng hợp từng mẻ từ 72 giờ xuống còn 24 giờ thông qua công nghệ dòng chảy liên tục.

Quy trình hóa học xanh
Sử dụng các dung môi có độc tính thấp (như etyl axetat thay vì diclometan) và chất xúc tác (như liên kết xúc tác enzym) để giảm ô nhiễm môi trường. Ví dụ, một nghiên cứu đã sử dụng liên kết xúc tác lipase để giảm 50% việc sử dụng dung môi.