Thiazolyl xanh CAS 298-93-1

Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. là một trong những nhà sản xuất và cung cấp thiazolyl blue cas 298-93-1 giàu kinh nghiệm nhất tại Trung Quốc. Chào mừng bạn đến bán buôn số lượng lớn thiazolyl xanh cas 298-93-1 chất lượng cao để bán tại đây từ nhà máy của chúng tôi. Dịch vụ tốt và giá cả hợp lý có sẵn.

Thiazolyl xanh, hay được biết đến với cái tên MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide), chứa đựng một tính hai mặt hấp dẫn - nó vừa là một công cụ quan trọng trong sinh học tế bào vừa là một hóa chất kỳ lạ mang tính chất tắc kè hoa. Loại bột tinh thể màu vàng này trải qua một quá trình biến đổi đáng kinh ngạc trong tế bào sống: các enzyme khử của ty thể tách vòng tetrazolium của nó, biến nó thành kết tủa formazan màu tím không hòa tan - một phản ứng nổi bật đến mức nó đã trở thành tiêu chuẩn vàng để đo khả năng sống của tế bào. Tuy nhiên, ngoài phòng thí nghiệm, MTT còn tiết lộ nhiều hành vi bí truyền hơn; cấu trúc tinh thể của nó tạo thành các mẫu "xương cá" đặc biệt dưới kính hiển vi, trong khi đặc tính oxy hóa khử của nó cho phép nó tham gia vào các phản ứng quang hóa kỳ lạ khi tiếp xúc với các bước sóng ánh sáng cụ thể. Điều kỳ lạ là hợp chất này thể hiện một hiện tượng hiếm gặp gọi là "metachromasia" - xuất hiện các màu khác nhau tùy thuộc vào nồng độ và môi trường phân tử - một đặc tính từng được các nhà hóa học dệt may khai thác để tạo ra thuốc nhuộm "thông minh". Các nghiên cứu gần đây đã phát hiện ra vai trò bất ngờ của nó như là chất ức chế yếu một số enzyme trong chuỗi hô hấp, gợi ý rằng thuốc thử xét nghiệm phổ biến này có thể đã ảnh hưởng một cách tinh vi đến chính quá trình trao đổi chất mà các nhà khoa học sử dụng nó để nghiên cứu. Khi hòa tan trong dung môi hữu cơ, dung dịch MTT thể hiện hiệu ứng dập tắt huỳnh quang bất thường khiến các nhà hóa học vật lý bối rối, cho thấy các tương tác giữa các phân tử phức tạp vẫn đang chờ giải thích đầy đủ.

Thiazolyl xanh,Tên hóa học là 3- (4,5-dimethyl-2-thiazole) -2,5-diphenyltetrazolium bromide, viết tắt là MTT, là một hợp chất hữu cơ quan trọng. Kể từ khi Mosman lần đầu tiên báo cáo việc sử dụng phương pháp nhuộm MTT để xác định sự phát triển và tỷ lệ sống của tế bào vào năm 1983, MTT đã được áp dụng rộng rãi trong các lĩnh vực như khoa học đời sống, nghiên cứu y học và phát triển thuốc. Sau đây là lời giải thích chi tiết về mục đích của nó:

Ứng dụng trong nghiên cứu sinh học tế bào

 

MTT là một trong những phương pháp cổ điển để xác định sự tăng sinh tế bào. Trong quá trình nuôi cấy tế bào, các dehydrogenase như succinate dehydrogenase trong ty thể của tế bào sống có thể khử MTT ngoại sinh thành formazan tinh thể màu xanh tím không hòa tan, lắng đọng trong tế bào. Tế bào chết thiếu khả năng khử này và do đó không tạo ra formazan. Bằng cách hòa tan formazan trong tế bào và đo giá trị hấp thụ ánh sáng của nó ở các bước sóng cụ thể (chẳng hạn như 490nm hoặc 562nm) bằng cách sử dụng máy đọc xét nghiệm miễn dịch hấp thụ liên kết enzyme (ELISA), số lượng tế bào sống có thể được phản ánh gián tiếp. Trong một phạm vi số lượng tế bào nhất định, lượng tinh thể MTT được hình thành tỷ lệ thuận với số lượng tế bào, do đó sự tăng sinh của tế bào có thể được xác định dựa trên giá trị độ hấp thụ đo được (giá trị OD).

Ứng dụng trong nghiên cứu sinh học tế bào

 

MTT cũng có thể được sử dụng để xác định độc tính của thuốc hoặc các phương pháp điều trị khác (như chiếu xạ) trên tế bào nuôi cấy trong ống nghiệm. Bằng cách so sánh các giá trị OD của nhóm điều trị và nhóm đối chứng, có thể đánh giá được tác dụng của thuốc hoặc phương pháp điều trị đối với hoạt động của tế bào. Giá trị OD càng lớn thì hoạt động của tế bào càng mạnh; Ngược lại, nó cho thấy hoạt động của tế bào càng yếu hoặc độc tính của tế bào càng lớn. Phương pháp này có ứng dụng rộng rãi trong sàng lọc thuốc, nghiên cứu độc tính và các lĩnh vực khác. Mặc dù MTT chủ yếu được sử dụng để đo sự tăng sinh tế bào và độc tính tế bào, nhưng trong một số trường hợp, nó cũng có thể được sử dụng để hỗ trợ nghiên cứu quá trình apoptosis của tế bào. Trong quá trình apoptosis của tế bào, hoạt động của enzyme bên trong tế bào thay đổi, điều này có thể ảnh hưởng đến khả năng khử MTT. Bằng cách so sánh sự khác biệt về giá trị OD giữa tế bào apoptotic và tế bào bình thường, sự xuất hiện của apoptosis tế bào có thể được xác định sơ bộ. Tuy nhiên, cần lưu ý rằng MTT không phải là phương pháp chuyên biệt để phát hiện apoptosis của tế bào và kết quả của nó cần được phân tích toàn diện kết hợp với các phương pháp phát hiện apoptosis khác.

Ứng dụng trong phát triển thuốc

 

Trong quá trình phát triển thuốc, xét nghiệm MTT là phương pháp sàng lọc thuốc có hiệu suất cao-thường được sử dụng. Bằng cách ủ thuốc thử nghiệm với tế bào và sử dụng xét nghiệm MTT để đo lường sự thay đổi trong hoạt động của tế bào, các phân tử thuốc có tiềm năng hoạt động có thể được sàng lọc nhanh chóng. Phương pháp này có ưu điểm là vận hành dễ dàng, kết quả đáng tin cậy, thông lượng cao và có giá trị ứng dụng quan trọng trong giai đoạn đầu phát triển thuốc. Xét nghiệm MTT cũng có thể được sử dụng để nghiên cứu cơ chế tác dụng của thuốc. Bằng cách so sánh những thay đổi trong hoạt động của tế bào trong các điều kiện điều trị bằng thuốc khác nhau, tác động của thuốc lên các quá trình như tăng sinh tế bào và apoptosis có thể được xác định sơ bộ. Bằng cách kết hợp các kỹ thuật sinh học phân tử khác như phương pháp Western blot và tế bào học dòng chảy, các mục tiêu và đường truyền tín hiệu của thuốc có thể được tiết lộ thêm. Trong đánh giá an toàn thuốc, xét nghiệm MTT có thể được sử dụng để đánh giá tác dụng độc hại của thuốc đối với tế bào. Bằng cách đo sự thay đổi giá trị OD của tế bào sau khi điều trị bằng thuốc, có thể xác định được thuốc có độc tính tế bào hay không và mức độ độc tính. Điều này có ý nghĩa rất lớn trong việc hướng dẫn nghiên cứu tiền lâm sàng và ứng dụng thuốc trên lâm sàng.

Ứng dụng MTT trong các lĩnh vực khác

 

Trong nghiên cứu miễn dịch, xét nghiệm MTT có thể được sử dụng để xác định khả năng tăng sinh của tế bào lympho. Bằng cách ủ tế bào lympho với kháng nguyên hoặc chất kích thích miễn dịch và đo lường sự thay đổi trong hoạt động của tế bào bằng xét nghiệm MTT, có thể đánh giá được khả năng đáp ứng miễn dịch của tế bào lympho. Phương pháp này có ứng dụng rộng rãi trong phát triển vắc xin, liệu pháp miễn dịch và các lĩnh vực khác. Trong nghiên cứu ung thư, xét nghiệm MTT có thể được sử dụng để xác định hoạt động tăng sinh và độ nhạy cảm với thuốc của tế bào khối u. Bằng cách so sánh những thay đổi về giá trị OD của tế bào khối u trong các điều kiện điều trị bằng thuốc khác nhau, các phân tử thuốc có tác dụng ức chế tế bào khối u có thể được sàng lọc và có thể đánh giá được tác dụng chống{4}}khối u của chúng. Điều này có ý nghĩa rất lớn trong việc hướng dẫn điều trị lâm sàng các khối u. Trong nghiên cứu độc tính môi trường, xét nghiệm MTT có thể được sử dụng để đánh giá tác động độc hại của các chất ô nhiễm môi trường lên tế bào. Bằng cách ủ các tế bào với nồng độ chất ô nhiễm khác nhau và đo lường sự thay đổi trong hoạt động của tế bào bằng xét nghiệm MTT, có thể xác định được độc tính và cơ chế hoạt động của các chất ô nhiễm. Điều này có ý nghĩa rất lớn trong việc đánh giá rủi ro sinh thái của các chất gây ô nhiễm môi trường và xây dựng các chính sách bảo vệ môi trường. 

Các bước thí nghiệm củathiazolyl xanhphương pháp:

1: Trypsin tiêu hóa các tế bào pha logarit, ly tâm và thu thập chúng sau khi kết thúc để tạo thành huyền phù tế bào và điều chỉnh nồng độ của nó lên 5-10 theo số lượng tế bào × 104/ml. Đối với người mới bắt đầu cần làm tế bào đạt 5-10 × 104/ml thường không biết bắt đầu từ đâu. Tôi ở đây để cung cấp cho bạn một phương pháp đơn giản để xác định ban đầu số lượng ô.

Lấy 25cm2 thường dùng để nuôi cấy tế bào làm ví dụ:

1) Mật độ tế bào khoảng 80%~90% (hình bên dưới thể hiện trạng thái gần đúng của các tế bào ở mật độ 80%~90%). Sau khi phân hủy và ly tâm, loại bỏ phần nổi phía trên và thêm 3ml môi trường để trộn.

2) Lấy một ống ly tâm vô trùng 15ml mới (dành cho bước cấy tiếp theo trên đĩa 96 giếng) và đổ vào khoảng 9ml môi trường

3) Lấy 1ml từ huyền phù tế bào 3ml đã chuẩn bị ở bước đầu tiên, cho vào ống trên và đếm số lượng tế bào sau khi trộn. Tại thời điểm này, nó thường là 5-10 hoặc ít hơn × 104/ml, tương đương với 5-10 ô trên mỗi ô trong 4 ô của bảng đếm ô (xem hình bên dưới); Nếu nồng độ không đủ thì thêm huyền phù tế bào theo kết quả đếm, mỗi giọt được tính là 50ul.

4) Số lượng ô cần được điều chỉnh theo các mục đích khác nhau của thí nghiệm. Ví dụ, trong thí nghiệm tăng sinh tế bào nói chung, có thể sử dụng 2000 tế bào trên mỗi giếng (tương đương với mật độ huyền phù tế bào là 2 × 104/ml), 5000 đến 10000 tế bào trên mỗi giếng (tương đương với mật độ huyền phù tế bào là 5 × 104/ml). Ngoài ra, số lượng tế bào cũng cần được xác định theo đặc điểm riêng của chúng, chẳng hạn như tốc độ tăng trưởng. Ví dụ, mật độ tế bào phát triển nhanh hơn có thể nhỏ hơn một chút.

2. Sau khi chuẩn bị huyền phù tế bào, trộn nhẹ nhàng và thêm 100ul vào mỗi lỗ, sao cho mật độ tế bào cần kiểm tra là 5000-10000/lỗ (lỗ cạnh được lấp đầy PBS vô trùng).

L Lưu ý: Vì tế bào sẽ tiếp tục lắng xuống sau khi trộn nên cần phải trộn nhiều lần trong quá trình cấy, chẳng hạn như trộn sáu lỗ một lần, để đảm bảo mật độ tế bào cấy giống hệt nhau giữa các lỗ, điều này rất quan trọng đối với kết quả của MTT.

3. Đặt đĩa nuôi cấy tế bào đã cấy vào tủ ấm để nuôi cấy cho đến khi lớp đơn tế bào phủ kín đáy lỗ (đĩa phẳng 96 lỗ) thì thêm thuốc có gradient nồng độ. Về nguyên tắc, thuốc có thể được thêm vào sau khi tế bào đã bám vào tường, hoặc hai giờ, hoặc nửa ngày, nhưng chúng ta thường thêm thuốc vào buổi chiều ngày hôm trước và sáng hôm sau. Nói chung, 5-7 độ dốc, 100ul mỗi lỗ và 3-5 lỗ nhiều được đặt. Nên đặt 6, nếu không sẽ khó phản ánh được tình hình thực tế. Hình dưới đây có thể được sử dụng làm bước tham khảo cho tấm 96 lỗ.

L Để định lượng, một số người trực tiếp thêm thuốc vào đĩa 96 giếng theo thể tích khác nhau để tạo thành gradient nồng độ. Nhưng tôi nghĩ chúng ta nên cố gắng trộn các nồng độ thuốc khác nhau trong ống EP, sau đó loại bỏ phần nổi phía trên nuôi cấy khỏi đĩa 96 giếng (có thể hút đi bằng súng phóng điện) và thêm 100ul môi trường nuôi cấy chứa các nồng độ thuốc khác nhau, có thể đảm bảo độ chính xác của nồng độ thuốc. Ngoài ra, cần lưu ý nếu sử dụng phương pháp này không được hút hết dung dịch nuôi cấy đĩa 96 giếng trước khi thêm thuốc. Nên thêm mẫu ngay sau khi hút một phần để tránh hiện tượng chết tế bào do đĩa 96 giếng bị khô.

Ủ với CO2 4,5% ở 37 độ trong 16-48 giờ, quan sát tác dụng của thuốc dưới kính hiển vi soi ngược. Hình dưới đây cho thấy độ dốc điển hình của độc tính tế bào.

4. Thêm 10ul dung dịch MTT (5mg/ml, tức là. 0.5% MTT) vào từng giếng và tiếp tục nuôi cấy trong 4 giờ. Nếu thuốc có thể phản ứng vớithiazolyl xanhCó thể loại bỏ dung dịch nuôi cấy sau khi ly tâm và có thể thêm dung dịch nuôi cấy chứa MTT sau khi rửa bằng PBS 2-3 lần.

5. Dừng nuôi cấy và chuẩn bị hòa tan và kết tinh.

Thiazolyl xanh, tên tiếng Trung là Methyl Blue, là một hợp chất hữu cơ quan trọng được sử dụng rộng rãi trong y học, sinh học và hóa học. trong y học, nó thường được sử dụng để điều trị ngộ độc nitrit, ngộ độc xyanua, v.v., đồng thời cũng được sử dụng trong chẩn đoán và điều trị bổ trợ một số bệnh; Trong nghiên cứu sinh học, nó có thể được sử dụng làm chất nhuộm màu để dán nhãn tế bào hoặc mô. Tuy nhiên, giống như nhiều loại thuốc, xanh methylene cũng có thể gây ra một loạt tác dụng phụ trong quá trình sử dụng:

Tác dụng phụ của hệ tiêu hóa

Buồn nôn và nôn là một trong những tác dụng phụ phổ biến của hệ tiêu hóa khi sử dụng xanh methylene. Khi xanh methylen xâm nhập vào cơ thể có thể kích thích niêm mạc đường tiêu hóa, gây buồn nôn, thậm chí nôn mửa trong trường hợp nặng. Triệu chứng này càng rõ rệt hơn khi tốc độ tiêm tĩnh mạch quá nhanh hoặc liều lượng quá lớn. Ví dụ, trong một số trường hợp lâm sàng, bệnh nhân có thể bị buồn nôn và nôn đáng kể ngay sau khi tiêm nhanh xanh methylene vào tĩnh mạch, điều này ảnh hưởng đến sự thoải mái và trải nghiệm điều trị của họ. Một số bệnh nhân có thể bị đau bụng sau khi sử dụng xanh methylene và mức độ đau có thể khác nhau tùy theo sự khác biệt của từng cá nhân, từ khó chịu nhẹ đến đau dữ dội hơn.

Đồng thời, cũng có thể kèm theo tiêu chảy, có thể do xanh methylen can thiệp vào nhu động ruột và chức năng tiêu hóa, dẫn đến nhu động ruột bất thường và thay đổi khả năng tiết dịch tiêu hóa. Tình trạng đau bụng, tiêu chảy kéo dài hoặc thường xuyên không chỉ ảnh hưởng đến quá trình hấp thụ chất dinh dưỡng và sức khỏe thể chất của người bệnh mà còn có thể dẫn đến các biến chứng khác.

Tác dụng phụ hệ tiết niệu

Sau khi sử dụng xanh methylen, màu nước tiểu sẽ chuyển sang màu xanh lam, nguyên nhân là do xanh methylen và các chất chuyển hóa của nó bài tiết vào nước tiểu qua thận. Nhìn chung, sự thay đổi màu nước tiểu này chỉ là tạm thời và sẽ không ảnh hưởng nghiêm trọng đến sức khỏe thể chất. Nhưng trong một số trường hợp đặc biệt, chẳng hạn như bệnh nhân mắc các bệnh về hệ tiết niệu, sự thay đổi màu nước tiểu có thể cản trở việc chẩn đoán bệnh và bác sĩ cần tiến hành phân tích toàn diện dựa trên các chỉ số khám khác. Khi đi tiểu, một số bệnh nhân có thể cảm thấy đau rát ở lỗ niệu đạo.

 

Điều này có thể do tác dụng kích thích của xanh methylene lên niêm mạc niệu đạo, nhất là khi nồng độ nước tiểu cao hoặc niêm mạc niệu đạo bị cọ xát khi đi tiểu, cảm giác châm chích sẽ rõ rệt hơn. Triệu chứng này có thể gây ra những khó chịu nhất định cho người bệnh và ảnh hưởng đến cuộc sống hàng ngày của họ.

Tác dụng phụ về thần kinh

Chóng mặt và nhức đầu là những tác dụng phụ về thần kinh thường gặp của xanh methylene. Sau khi sử dụng xanh methylen, bệnh nhân có thể cảm thấy chóng mặt, mất phương hướng ở đầu hoặc cảm thấy khó chịu như sưng tấy, đau đầu. Triệu chứng này có thể ảnh hưởng đến khả năng chú ý và tư duy của người bệnh, làm giảm hiệu quả công việc và cuộc sống. Sự xuất hiện chóng mặt và đau đầu có thể liên quan đến tác động của xanh methylene lên mạch máu và dây thần kinh não, và cơ chế cụ thể vẫn cần được nghiên cứu thêm. Trong một số ít trường hợp, xanh methylen có thể gây rối loạn ý thức như buồn ngủ, hôn mê, v.v.

Điều này thường là do sử dụng quá nhiều xanh methylene hoặc bệnh nhân quá nhạy cảm với thuốc, gây ức chế nghiêm trọng hệ thần kinh trung ương. Rối loạn ý thức là một tác dụng phụ nghiêm trọng có thể gây nguy hiểm đến tính mạng của bệnh nhân và cần được điều trị cấp cứu ngay lập tức.

1. Công dụng của tetrazolium bromide thiazolyl xanh là gì?

Thiazolyl Blue Tetrazolium Blue (MTT) có thể được sử dụng để đo sự tăng sinh tế bào. MTT tạo ra dung dịch màu vàng nhạt, dung dịch này được chuyển thành màu xanh đậm, MTT formazan{1}}không tan trong nước nhờ enzyme dehydrogenase của ty thể của tế bào sống.

2. Bảo quản Thiazolyl Blue có an toàn không?

Điều kiện nhiệt độ: Đậy kín bột và bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ -20 độ để bảo quản đông lạnh, điều này có thể kéo dài thời hạn sử dụng một cách hiệu quả (thường là 1–2 năm); để bảo quản ngắn hạn (trong vòng 1 tháng), nó có thể được giữ tạm thời trong điều kiện làm lạnh 4 độ.

Yêu cầu-chống ánh sáng và chống ẩm-: Bột MTT nhạy cảm-với ánh sáng và phải được bảo quản trong chai thuốc thử màu nâu hoặc chai trong suốt được bọc bằng giấy thiếc. Trong khi đó, nên thêm chất làm khô (ví dụ: silica gel) để tránh bột hút ẩm và đóng bánh.

3. Màu xanh Thiazolyl có thay đổi không?

Khi dung dịch có kết tủa màu xanh tím hoặc sẫm màu chứng tỏ dung dịch đã bị oxy hóa và không thể tiếp tục sử dụng.
Tránh đặt dung dịch ở nhiệt độ phòng hoặc trong môi trường ánh sáng vì nó có thể nhanh chóng bị hỏng.

Chú phổ biến: thiazolyl blue cas 298-93-1, nhà cung cấp, nhà sản xuất, nhà máy, bán buôn, mua, giá, số lượng lớn, để bán