bột iptgcó thể được sử dụng tại vị trí tác dụng gây tê cục bộ, nó được dùng làm chất lan truyền để-giảm đau vết thương sau phẫu thuật và đau do loét. Thuốc thử sinh học phân tử thường được sử dụng trong sàng lọc đốm xanh và trắng và biểu hiện protein do IPTG gây ra ở vi khuẩn. IPTG, tên đầy đủ isopropyl- - D-thiogalactoside, CAS 367-93-1, công thức phân tử C9H18O5S, trọng lượng phân tử 384,37 Daltons, thuộc hợp chất phân tử nhỏ. Bột màu trắng hoặc gần như trắng, ít tan trong nước nhưng tan tốt hơn trong dung môi hữu cơ. Trong phân tử có các nhóm ion nên chúng có độ dẫn điện nhất định trong nước. Ổn định ở nhiệt độ phòng, nhưng dễ bị phân hủy ở nhiệt độ cao hoặc điều kiện axit và kiềm mạnh. Không có mùi rõ ràng, nhưng có thể phát ra mùi hợp chất hữu cơ nhẹ trong quá trình sử dụng. Nó là một chất cảm ứng thường được sử dụng để tạo ra sự biểu hiện protein ở vi khuẩn. Trong chẩn đoán y tế, IPTG có thể đóng vai trò là đầu dò huỳnh quang hoặc tác nhân tạo màu để phát hiện các phân tử hoặc mô cụ thể trong mẫu. Bằng cách kết hợp với các phân tử mục tiêu, IPTG có thể tạo ra tín hiệu huỳnh quang hoặc thay đổi màu sắc, hỗ trợ mạnh mẽ cho việc chẩn đoán bệnh.

|
hình thái học |
Bột tinh thể |
|
Màu sắc |
Trắng |
|
điểm nóng chảy |
105 độ C |
|
điểm sôi |
350,9 độ C (ước tính sơ bộ) |
|
Tỉ trọng |
1,3329 (ước tính sơ bộ) |
|
Điều kiện bảo quản |
2-8 độ C |
|
rượu hòa tan |
hòa tanhòa tan 40 phần dung môi |
|
Hệ số axit ( pKa ) |
13,00 ± 0,70 ( Dự đoán ) |
|
Hòa tan trong nước |
50mg / ml |
|
Điểm chớp cháy |
197,8 độ |
|
độ hòa tan |
1.6g/l |
|
Mật độ hơi |
5,21 (so với không khí) |
|
chỉ số khúc xạ |
1,5060 ( ước tính ) |
|
|
|
bột Iptg,Các thông số vật lý, Mp. : 114 ~ 121 độ C, Mô tả công dụng, Thuốc thử sinh học phân tử thông thường, thường được sử dụng trong sàng lọc màu xanh-trắng và biểu hiện protein IPTG-ở vi khuẩn. , Quy cách đóng gói , 1G, 5G, 25G, 100G, 1KG , Điều kiện bảo quản
Làm lạnh 2-8 độ, tránh ánh sáng , Mô tả mối nguy hiểm , Mã nguy hiểm : Xi , Mức độ rủi ro : R36/37/38 , Mức độ an toàn : S23-24/25-36.
IPTG thường được sử dụng trong các thử nghiệm nhân bản cần kích thích hoạt động của -galactosidase. Nó thường được sử dụng kết hợp với X-Gal hoặc Bluo-Gal để sàng lọc màu trắng-màu xanh lam của các khuẩn lạc vi khuẩn tái tổ hợp, có thể được Chemicalbook tạo ra để biểu hiện operon lac ở E. coli. IPTG liên kết với protein ức chế lacI và thay đổi cấu hình của nó để ngăn chặn sự ức chế gen lacZ được mã hóa bởi -galactosidase.

IPTG, tên đầy đủ isopropyl- -D-thiogalactoside là một chất cảm ứng thường được sử dụng rộng rãi để cảm ứng và điều chỉnh biểu hiện protein. Do cấu trúc và chức năng độc đáo của nó, IPTG thường được điều chế bằng cách sử dụngbột iptgphương pháp tổng hợp trong phòng thí nghiệm.
Tuyến đường tổng hợp
1. Tổng hợp Glycoside:
Sự tổng hợp đầu tiên -D-thiogalactoside thường được tổng hợp bằng phương pháp tổng hợp glycoside, bằng cách ngưng tụ galactose với các bazơ tương ứng (chẳng hạn như isopropyl). Bước này yêu cầu sử dụng các nhóm bảo vệ để tránh tạo ra-sản phẩm phụ trong các phản ứng tiếp theo.
2. Phản ứng phosphoryl hóa:
Trên cơ sở tổng hợp glycoside, các nhóm photphat được đưa vào thông qua phản ứng phosphoryl hóa để thu được este nhóm isopropyl- -D-thiogalactoside-5'-phosphate. Bước này yêu cầu sử dụng phốt phát và anhydrit hoặc axit tương ứng.
3. Nhóm hủy bảo vệ:
Bằng phản ứng khử nhóm bảo vệ, nhóm bảo vệ trong glycoside được loại bỏ để thu được sản phẩm mục tiêu là isopropyl- - D-thiogalactoside. Bước này yêu cầu sử dụng dung dịch axit hoặc kiềm để tạo điều kiện thuận lợi cho phản ứng.

Các bước thí nghiệm:
Chuẩn bị thuốc thử và dụng cụ:
Chuẩn bị các loại đường, bazơ, nhóm bảo vệ, photphat, anhydrit hoặc axit, dung môi và thuốc thử khác cần thiết cũng như các dụng cụ thí nghiệm cần thiết như máy khuấy, nhiệt kế, máy đo quang phổ, v.v.
Tổng hợp glycoside:
Đun nóng và khuấy galactose với các bazơ tương ứng trong dung môi, thêm chất xúc tác và thúc đẩy phản ứng ngưng tụ. Bước này đòi hỏi phải kiểm soát chặt chẽ nhiệt độ và thời gian khuấy để đảm bảo phản ứng diễn ra suôn sẻ.
Phản ứng phosphoryl hóa:
Các glycosid tổng hợp được đun nóng và khuấy với photphat, anhydrit hoặc axit trong dung môi và chất xúc tác được thêm vào để thúc đẩy phản ứng phosphoryl hóa. Bước này đòi hỏi phải kiểm soát nhiệt độ và thời gian khuấy, đồng thời chú ý đến độ phân cực và liều lượng của dung môi để đảm bảo diễn ra phản ứng và tạo ra sản phẩm.
Nhóm hủy bảo vệ:
Loại bỏ nhóm bảo vệ khỏi sản phẩm phosphoryl hóa trong dung dịch axit hoặc kiềm để thu được sản phẩm mục tiêu isopropyl- - D-thiogalactoside. Bước này yêu cầu kiểm soát giá trị pH và nhiệt độ, đồng thời chú ý đến độ phân cực và liều lượng của dung môi để đảm bảo diễn ra phản ứng và tạo ra sản phẩm.
Tách và tinh chế:
Sản phẩm mục tiêu được tách khỏi hỗn hợp phản ứng thông qua sắc ký cột, kết tinh lại và các phương pháp tách và tinh chế khác. Bước này đòi hỏi phải chú ý đến các điều kiện vận hành như nhiệt độ, liều lượng dung môi, tốc độ dòng chảy… để đảm bảo độ tinh khiết và hiệu suất của sản phẩm.
Phân tích và nhận dạng:
Việc xác định cấu trúc của sản phẩm mục tiêu được thực hiện thông qua các phương pháp phân tích như cộng hưởng từ hạt nhân và phép đo phổ khối. Bước này yêu cầu sử dụng các dụng cụ, thiết bị, phương tiện kỹ thuật tương ứng để xác nhận cấu trúc, độ tinh khiết của sản phẩm.

bột iptgtên đầy đủ isopropyl- - D-thiogalactoside là một chất cảm ứng thường được sử dụng rộng rãi để cảm ứng và điều chỉnh biểu hiện protein.
1. Cảm ứng biểu hiện protein:
IPTG đóng vai trò quan trọng trong việc cảm ứng biểu hiện protein. Nó là một chất cảm ứng được sử dụng rộng rãi, có thể tạo ra sự biểu hiện của các gen cụ thể ở vi khuẩn một cách hiệu quả, từ đó thu được protein mục tiêu mong muốn trong một khoảng thời gian ngắn. Cơ chế hoạt động của nó là liên kết với gen lacI của vi khuẩn, ức chế hoạt động của protein điều hòa phiên mã, từ đó mở operon lac của vi khuẩn và bắt đầu biểu hiện gen mục tiêu. Khi sử dụng operon lactose làm chất xúc tiến biểu hiện protein thì cần phải có chất cảm ứng và IPTG có thể hoạt động như một chất tương tự lactose để tạo ra sự biểu hiện galactosidase ở Escherichia coli. Nó không thể được sử dụng bởi các tế bào để đạt được biểu hiện bền vững. IPTG liên kết với lac|sản phẩm, gây ra những thay đổi về hình dạng khỏi lacO, từ đó kích hoạt quá trình phiên mã. Quy định phiên mã cảm ứng này đã trở thành một yếu tố được sử dụng phổ biến trong việc xây dựng các vectơ hệ thống biểu hiện E. coli.
2. Điều hòa biểu hiện gen:
IPTG đóng vai trò quan trọng trong việc điều hòa biểu hiện gen. Là một thuốc thử thí nghiệm quan trọng, nó đóng vai trò quan trọng trong việc điều hòa biểu hiện gen và các thí nghiệm biểu hiện quá mức protein. Bằng cách kiểm soát thời gian bổ sung và nồng độ IPTG, có thể đạt được sự điều hòa biểu hiện protein mục tiêu. Hiệu lực điều chỉnh này dựa trên sự ràng buộc của IPTG với lac|các sản phẩm trong operon lactose, làm thay đổi cấu hình của chúng, do đó để lại lacO và tiếp tục kích hoạt quá trình phiên mã. Cơ chế điều hòa phiên mã cảm ứng này làm cho IPTG có ý nghĩa to lớn trong các lĩnh vực nghiên cứu như chức năng gen, tương tác protein và sàng lọc thuốc.
3. Kết tinh protein:
Trong các thí nghiệm kết tinh protein, IPTG được sử dụng làm chất cảm ứng để thúc đẩy quá trình kết tinh protein. Cơ chế hoạt động của nó là thay đổi cấu trúc của protein bằng cách liên kết với các vùng kỵ nước trong protein, từ đó thúc đẩy sự kết tụ và kết tinh giữa các phân tử protein. Quá trình kết tụ và kết tinh này có thể đảo ngược, do đó quá trình kết tinh protein có thể được tạo ra bằng cách thêm IPTG hoặc tinh thể protein có thể được hòa tan bằng cách loại bỏ IPTG.
Trong các thí nghiệm kết tinh protein, IPTG thường được thêm vào dung dịch protein với nồng độ cuối cùng là 1mM. Nồng độ IPTG thấp này có thể tránh được việc tạo ra quá nhiều protein, do đó đạt được hiệu quả kết tinh tốt hơn. Đồng thời, IPTG cũng có thể đóng vai trò là người đi kèm phân tử để hỗ trợ việc gấp và tổng hợp protein chính xác, từ đó thu được các tinh thể protein đồng nhất hơn.
Cần lưu ý rằng IPTG không thúc đẩy quá trình kết tinh protein trong mọi trường hợp. Một số protein không nhạy cảm với IPTG hoặc do cấu trúc và đặc tính vốn có của chúng không phù hợp cho quá trình kết tinh, nên cần xác nhận và tối ưu hóa thử nghiệm đối với các protein khác nhau để xác định các điều kiện và phương pháp kết tinh tối ưu.
Phản ứng bất lợi
Độc tính tế bào

Độc tính đối với tế bào nhân sơ
Mặc dù IPTG thường được sử dụng để tạo ra biểu hiện gen ở tế bào nhân sơ, nhưng nồng độ IPTG cao có thể có tác dụng độc hại đối với tế bào nhân sơ. Nghiên cứu đã chỉ ra rằng khi nồng độ IPTG quá cao, nó có thể cản trở quá trình trao đổi chất bình thường trong tế bào. Ví dụ, nó có thể ảnh hưởng đến quá trình chuyển hóa năng lượng của tế bào, cản trở các con đường như quá trình glycolysis và chu trình axit tricarboxylic, dẫn đến giảm sản xuất ATP nội bào và ảnh hưởng đến sự phát triển và tăng sinh của tế bào. Ngoài ra, nồng độ IPTG cao còn có thể làm hỏng tính nguyên vẹn của màng tế bào, tăng tính thấm, dẫn đến rò rỉ các chất nội bào và tạo điều kiện cho các chất độc hại từ môi trường ngoại bào xâm nhập vào tế bào, từ đó gây chết tế bào. Các thí nghiệm đã phát hiện ra rằng khi Escherichia coli được nuôi cấy trong môi trường chứa nồng độ IPTG cao, tốc độ phát triển của vi khuẩn chậm lại đáng kể và số lượng vi khuẩn sống sót giảm dần khi kéo dài thời gian nuôi cấy. Điều này chỉ ra rằng nồng độ IPTG cao có tác dụng ức chế và tiêu diệt nhất định đối với Escherichia coli.
Độc tính đối với tế bào nhân chuẩn
Ngoài tế bào nhân sơ, IPTG cũng có thể gây độc cho tế bào nhân chuẩn. Có một số khác biệt nhất định về cấu trúc và chức năng giữa tế bào nhân chuẩn và tế bào nhân sơ, nhưng IPTG vẫn có thể ảnh hưởng đến chức năng sinh lý bình thường của tế bào nhân chuẩn thông qua nhiều con đường khác nhau. Một mặt, IPTG có thể cản trở đường dẫn truyền tín hiệu trong tế bào nhân chuẩn. Sự truyền tín hiệu trong tế bào đóng vai trò điều tiết quan trọng trong các quá trình như tăng trưởng, biệt hóa và apoptosis. IPTG có thể làm thay đổi cường độ và hướng truyền tín hiệu bằng cách tương tác với các phân tử tín hiệu nhất định trong tế bào, do đó ảnh hưởng đến hoạt động sinh lý bình thường của tế bào.


Độc tính đối với tế bào nhân chuẩn
Mặt khác, IPTG có thể gây ra phản ứng căng thẳng oxy hóa trong tế bào nhân chuẩn. Căng thẳng oxy hóa đề cập đến sự mất cân bằng giữa quá trình oxy hóa nội bào và hoạt động chống oxy hóa, dẫn đến sự gia tăng sản xuất các loại oxy phản ứng (ROS). ROS quá mức có thể tấn công các phân tử sinh học như DNA, protein và lipid trong tế bào, gây tổn thương tế bào và suy giảm chức năng. Nghiên cứu đã phát hiện ra rằng trong một số điều kiện nhất định, việc xử lý IPTG đối với tế bào nhân chuẩn làm tăng đáng kể nồng độ ROS nội bào, kèm theo giảm khả năng sống sót của tế bào và tăng tỷ lệ apoptosis. Điều này cho thấy IPTG có thể gây ra phản ứng căng thẳng oxy hóa và gây độc tính trên tế bào nhân chuẩn.
Chú phổ biến: bột iptg cas 367-93-1, nhà cung cấp, nhà sản xuất, nhà máy, bán buôn, mua, giá, số lượng lớn, để bán




