Fluorescamine, công thức hóa học C17H10O4, trọng lượng phân tử 278,26, số CAS 38183-12-9, là thuốc thử hóa học quan trọng được sử dụng rộng rãi trong lĩnh vực hóa sinh và hóa phân tích. Nó thường tồn tại ở dạng bột màu trắng đến trắng nhạt, đôi khi cũng có thể có màu vàng nhạt. Dạng bột giúp dễ vận hành và cân trong phòng thí nghiệm. Độ hòa tan trong nước thấp, có vẻ ít tan. Tuy nhiên, nó có thể hòa tan tốt trong các dung môi hữu cơ khác nhau như acetonitril, axeton, etanol, chloroform và dimethyl sulfoxide. Đặc tính hòa tan này cho phép điều chế và phản ứng các amin huỳnh quang trong phòng thí nghiệm bằng cách chọn dung môi thích hợp. Bản thân nó không có đặc tính huỳnh quang nhưng có thể phản ứng với các hợp chất chứa nhóm amin bậc một (như protein, peptide, axit amin, v.v.) để tạo ra các hợp chất có huỳnh quang mạnh. Đặc tính này làm cho nó trở thành một thuốc thử dẫn xuất huỳnh quang quan trọng. Có thể phản ứng với các nhóm amin bậc một của axit amin trong điều kiện ôn hòa để tạo thành phức hợp ổn định, có độ huỳnh quang cao, nền thấp. Phức hợp này có độ nhạy cao trong phát hiện huỳnh quang và do đó được sử dụng rộng rãi để phân tích định lượng và phát hiện axit amin. Trong phân tích protein, nó cũng có thể phản ứng với các nhóm amino chính của protein để tạo ra các dẫn xuất huỳnh quang. Bằng cách phát hiện cường độ huỳnh quang của các dẫn xuất này, có thể đạt được phân tích định lượng hàm lượng protein.

|
|
|
|
Công thức hóa học |
C17H10O4 |
|
Khối lượng chính xác |
278 |
|
Trọng lượng phân tử |
278 |
|
m/z |
278 (100.0%), 279 (18.4%), 280 (1.6%) |
|
Phân tích nguyên tố |
C, 73.38; H, 3.62; O, 23.00 |

Fluorescaminelà thuốc thử hóa học quan trọng có ứng dụng rộng rãi trong lĩnh vực hóa sinh và hóa phân tích.
1. Phát hiện và phân tích huỳnh quang
Phát hiện axit amin: Nó có thể phản ứng với nhóm axit amin chính trong điều kiện nhẹ để tạo thành phức hợp ổn định, huỳnh quang cao và nền thấp. Phức hợp này có độ nhạy cao trong phát hiện huỳnh quang và thường được sử dụng để phân tích định lượng axit amin.
Phân tích protein: Nó cũng có thể phản ứng với các nhóm amino chính của protein để tạo ra các dẫn xuất huỳnh quang, được sử dụng để phát hiện định lượng và nghiên cứu cấu trúc của protein. Bằng cách phát hiện cường độ huỳnh quang của các dẫn xuất này, có thể đánh giá được hàm lượng protein và sự thay đổi cấu trúc.


2. Phát hiện huỳnh quang sắc ký lỏng
Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) kết hợp với phát hiện huỳnh quang là kỹ thuật được sử dụng phổ biến trong phân tích sinh hóa. Là thuốc thử dẫn xuất huỳnh quang, nó có thể tăng cường tín hiệu huỳnh quang của hợp chất mục tiêu, cải thiện độ nhạy và độ chọn lọc của việc phát hiện. Công nghệ này được sử dụng rộng rãi trong các lĩnh vực như proteomics và chuyển hóa thuốc.
3. Nghiên cứu giải trình tự protein và cấu trúc
Trong nghiên cứu cấu trúc và giải trình tự protein, nó có thể được sử dụng để dán nhãn các vị trí hoặc dư lượng cụ thể trên protein, giúp các nhà nghiên cứu xác định trình tự và cấu trúc của protein. Phương pháp ghi nhãn này giúp hiểu được chức năng và sự tương tác của protein.
4. Phát hiện enzyme phân giải protein
Có thể phản ứng với cơ chất của enzym phân giải protein để tạo ra sản phẩm huỳnh quang. Bằng cách theo dõi sự thay đổi cường độ huỳnh quang của các sản phẩm này, có thể đánh giá được hoạt tính và đặc tính động học của các enzym phân giải protein. Điều này có ý nghĩa rất lớn trong việc nghiên cứu cơ chế xúc tác của enzyme và chất ức chế sàng lọc.
1. Sàng lọc thuốc
Trong quá trình phát triển thuốc, nó có thể được sử dụng để sàng lọc các mục tiêu thuốc tiềm năng. Bằng cách liên kết và phản ứng với mục tiêu, các amin huỳnh quang có thể tiết lộ cơ chế tương tác giữa thuốc và mục tiêu, cung cấp thông tin quan trọng cho việc thiết kế và tối ưu hóa thuốc.
2. Nghiên cứu chuyển hóa thuốc
Nó cũng có thể được sử dụng để nghiên cứu chuyển hóa thuốc. Bằng cách dán nhãn các nhóm chức năng cụ thể lên thuốc hoặc chất chuyển hóa của chúng, các amin huỳnh quang có thể giúp các nhà nghiên cứu theo dõi quá trình trao đổi chất và tỷ lệ thuốc trong cơ thể. Điều này rất quan trọng để đánh giá tính an toàn và hiệu quả của thuốc.
Các ứng dụng khác
1. Quan trắc môi trường
Mặc dù ứng dụng trực tiếp của nó trong giám sát môi trường còn hạn chế, nhưng đặc tính của nó như một thuốc thử dẫn xuất huỳnh quang cung cấp một cách tiếp cận mới để giám sát môi trường. Bằng cách kết hợp với các công nghệ phát hiện khác, có thể đóng vai trò quan trọng trong việc giám sát môi trường, chẳng hạn như phát hiện các chất ô nhiễm trong các vùng nước.
2. Công cụ giảng dạy và nghiên cứu
Trong lĩnh vực giảng dạy và nghiên cứu, nó là một trong những công cụ không thể thiếu. Bằng cách chứng minh quá trình và kết quả phản ứng của các amin huỳnh quang với các hợp chất khác nhau, sinh viên và nhà nghiên cứu có thể hiểu rõ hơn về nguyên tắc và phương pháp cơ bản của hóa sinh và hóa phân tích.

Sự tổng hợp củaFluorescamineamin thường liên quan đến các nguyên liệu thô như axit benzoic, ethylenediamine, chloroform hoặc các dung môi, chất xúc tác khác (như axit hoặc bazơ). Trong một số trường hợp, chất oxy hóa hoặc chất khử cũng có thể được sử dụng, nhưng chúng ít phổ biến hơn trong quá trình tổng hợp trực tiếp các amin huỳnh quang.
Các bước tổng hợp và phương trình hóa học
Thứ nhất, axit benzoic có thể trải qua phản ứng amid hóa với ethylenediamine để tạo ra N-phenylethylenediamine amide (ở đây chúng tôi giả sử một sản phẩm trung gian đơn giản hóa, vì sản phẩm trung gian thực tế có thể phức tạp hơn). Bước này thường cần được thực hiện trong điều kiện axit hoặc kiềm để thúc đẩy phản ứng giữa các nhóm carboxyl và amino.
Phương trình hóa học (giả sử sản phẩm trung gian là N-phenylethylenediamine amide):
Axit Benzoic + Ethylenediamine → N-Phenylethylenediamide + Nước
Lưu ý: Phương trình này là biểu diễn sơ đồ và các sản phẩm amit khác nhau có thể được tạo ra trong các phản ứng thực tế, cần có chất xúc tác (như axit hoặc bazơ) và điều kiện phản ứng thích hợp (như nhiệt độ và dung môi).
Các bước tiếp theo có thể liên quan đến các phản ứng tạo vòng, bao gồm việc chuyển đổi một phần cấu trúc amit thành cấu trúc tuần hoàn. Tuy nhiên, phản ứng vòng hóa chuyển đổi trực tiếp N{1}}phenylethylenediamine amit thành amin huỳnh quang không tồn tại do cấu trúc của amin huỳnh quang phức tạp hơn, bao gồm cả cấu trúc benzoxazolone. Vì vậy, bước này yêu cầu giới thiệu các nhóm chức năng khác hoặc sửa đổi thêm về cấu trúc.
Phản ứng vòng hóa giả định (chỉ để minh họa, không phải con đường thực tế):
N-Phenylethylenediamide → Hợp chất tuần hoàn trung gian
Ở đây, 'Hợp chất tuần hoàn trung gian' đại diện cho một hợp chất tuần hoàn trung gian hư cấu đòi hỏi phản ứng tiếp theo để chuyển đổi thành amin huỳnh quang.
Để chuyển đổi các chất trung gian tuần hoàn thành các amin huỳnh quang, có thể cần phải có quá trình oxy hóa, halogen hóa, ngưng tụ hoặc các loại phản ứng chuyển đổi nhóm chức khác. Các loại và điều kiện cụ thể của các phản ứng này phụ thuộc vào cấu trúc của chất trung gian và cấu trúc của sản phẩm mục tiêu là amin huỳnh quang.
Do con đường tổng hợp các amin huỳnh quang phức tạp và đa dạng nên không thể cung cấp một phương trình hóa học chính xác ở đây. Nhưng nói chung, những phản ứng này có thể liên quan đến việc sử dụng các chất oxy hóa (như hydro peroxide, kali permanganat, v.v.) để tạo ra các nguyên tử oxy hoặc sử dụng các tác nhân halogen hóa (như khí clo, natri bromua, v.v.) để tạo ra các nguyên tử halogen và các phản ứng tiếp theo để tạo thành cấu trúc đặc trưng của các amin huỳnh quang.
Bất kể sử dụng con đường tổng hợp nào thì cuối cùng, hỗn hợp phản ứng cũng cần phải được tinh chế để thu được các amin huỳnh quang có độ tinh khiết cao. Các phương pháp tinh chế có thể bao gồm lọc, rửa, sấy khô, kết tinh, kết tinh lại, tách sắc ký, v.v. Các bước này nhằm mục đích loại bỏ tạp chất và nguyên liệu thô chưa phản ứng để cải thiện độ tinh khiết và hiệu suất của sản phẩm.Fluorescamine.

Nguyên lý phát hiện amin huỳnh quang đối với các nhóm amin là công nghệ phát hiện huỳnh quang dựa trên phản ứng hóa học, sử dụng phản ứng đặc hiệu giữa amin huỳnh quang và nhóm amin (đặc biệt là nhóm amin bậc một) để tạo ra các sản phẩm có huỳnh quang mạnh, từ đó đạt được khả năng phát hiện nhạy cảm các nhóm amin.
các loại gia công CNC
Đặc tính cơ bản của amin huỳnh quang
Amin huỳnh quang là một hợp chất hữu cơ có chứa các nhóm chức năng cụ thể trong cấu trúc phân tử của nó. Các nhóm chức này có thể trải qua những thay đổi hóa học khi phản ứng với các nhóm amino, tạo ra các chất huỳnh quang mới. Bản thân các amin huỳnh quang không có huỳnh quang đáng kể trong điều kiện bình thường, nhưng một khi chúng phản ứng với các nhóm amino, đặc tính huỳnh quang của chúng sẽ thay đổi đáng kể, cho phép các sản phẩm được tạo ra phát ra huỳnh quang mạnh dưới sự kích thích ánh sáng có bước sóng cụ thể.
máy phay CNC
Cơ chế phản ứng giữa amin huỳnh quang và nhóm amino
Phản ứng giữa amin huỳnh quang và nhóm amino chủ yếu xảy ra giữa nhóm carbonyl (C{0}}O) của amin huỳnh quang và nguyên tử nitơ của nhóm amino. Trong điều kiện phản ứng thích hợp (chẳng hạn như giá trị pH, nhiệt độ nhất định, v.v.), nhóm carbonyl của amin huỳnh quang sẽ trải qua phản ứng ngưng tụ với nhóm amino, tạo thành cấu trúc bazơ Schiff. Quá trình phản ứng này thường đi kèm với sự phá vỡ và hình thành các liên kết hóa học cũng như sự thay đổi cấu trúc điện tử, dẫn đến những thay đổi đáng kể về tính chất huỳnh quang.
Cụ thể, khi amin huỳnh quang phản ứng với một nhóm amino, nguyên tử oxy carbonyl trong phân tử amin huỳnh quang tấn công nguyên tử nitơ của nhóm amino, tạo thành liên kết đôi nitơ carbon mới (C=N). Phản ứng này không chỉ làm thay đổi cấu trúc điện tử của các phân tử amin huỳnh quang mà còn cho phép các sản phẩm được tạo ra phát ra huỳnh quang mạnh dưới sự kích thích của tia cực tím hoặc ánh sáng khả kiến. Cường độ và bước sóng của tín hiệu huỳnh quang này thường liên quan đến nồng độ chất phản ứng, điều kiện phản ứng và cấu trúc của sản phẩm.
Câu hỏi thường gặp
Phản ứng của fluorescamine với amin là gì?
Fluorescamine được định nghĩa là thuốc nhuộm hoạt tính-aminehình thành các chất cộng huỳnh quang mạnh khi phản ứng với các amin bậc một của protein, cho phép nhuộm protein trước khi điện di trên gel ống SDS. Nó thể hiện mức kích thích tối đa ở khoảng 390 nm và mức phát xạ tối đa ở khoảng 475 nm.
Axit amin nào có tính huỳnh quang?
Ba axit amin phát huỳnh quang tự nhiên là tryptophan (Trp), tyrosine (Tyr) và phenylalanine (Phe). Trong khi cả ba chất này đều có tính huỳnh quang thì tryptophan được sử dụng rộng rãi nhất trong các ứng dụng sinh học vì nó có đặc tính huỳnh quang mạnh nhất, mặc dù bước sóng của nó nằm trong phạm vi tia cực tím.
Những hóa chất nào là huỳnh quang?
Dẫn xuất Xanthene: fluorescein, rhodamine, Oregon xanh, eosin và đỏ Texas.
Các dẫn xuất của cyanine: cyanine, indocarbocyanine, oxacarbocyanine, thiacarbocyanine và merocyanine.
Dẫn xuất squaraine và các chất squarain thay thế vòng{0}}, bao gồm cả thuốc nhuộm Seta và Square.
Dẫn xuất squaraine rotaxane: Xem thuốc nhuộm Tau.
Huỳnh quang phát hiện những gì?
Đo huỳnh quang là kỹ thuật đo bất kỳ thông số nào bằng cách sử dụng phát xạ huỳnh quang. Trong bối cảnh khoa học sinh học hiện đại, phép đo huỳnh quang được sử dụng để phát hiệncác đại phân tử sinh học như proteinvà đo nồng độ của chúng trong mẫu thí nghiệm.
Chú phổ biến: fluorescamine cas 38183-12-9, nhà cung cấp, nhà sản xuất, nhà máy, bán buôn, mua, giá, số lượng lớn, để bán




