Trình tự axit amin của LC553 là Ac Glu Glu Met Gln Arg Arg Ala Asp-NH2 và các đặc điểm hình dạng của nó chủ yếu được đặc trưng bởi khả năng xoay - và uốn ngẫu nhiên. Góc - tạo thành liên kết hydro giữa oxy carbonyl của gốc thứ nhất và hydro imino của gốc thứ tư, khiến chuỗi peptide bị gấp 180 độ. Cấu trúc này chiếm vị trí trung tâm trong LC553. Ví dụ: cấu hình góc - của Glam1-Asp8 có thể ổn định vùng đầu C của chuỗi peptide, trong khi khả năng cuộn ngẫu nhiên của Met3-Arg6 mang lại cho nó tính linh hoạt về hình dạng. Sự kết hợp "cứng nhắc linh hoạt" này cho phép LC553 duy trì hoạt động liên kết với SNAP-25 trong khi thích ứng với các yêu cầu về hình dạng của các môi trường vi mô khác nhau.

Dữ liệu thực nghiệm cho thấy trong dung dịch đệm photphat có pH 7,4, phổ lưỡng sắc tròn (CD) của LC553 thể hiện cực đại âm ở bước sóng 200 nm, cho thấy nó có đặc điểm chủ yếu là uốn cong ngẫu nhiên; Sau khi thêm 10% trifluoroetanol (TFE), cực đại dương xuất hiện ở bước sóng 220 nm, biểu thị sự cải thiện cấu trúc góc -. Khả năng điều chỉnh về hình dạng này có liên quan chặt chẽ đến chức năng của nó: trong lớp sừng của da, cấu trúc xoăn ngẫu nhiên có thể làm giảm năng lượng tương tác giữa chuỗi peptide và lớp lipid kép, thúc đẩy sự thẩm thấu; Trong các đại thực bào, cấu trúc góc beta tăng cường ái lực liên kết của nó với SNAP-25 và ức chế phản ứng tổng hợp lysosome autophagosome.

Cấu trúc bậc ba của LC553 được xác định bởi sự phân bố điện tích bề mặt và lõi kỵ nước. Các gốc kỵ nước (Met3, Ala7) nằm ở trung tâm của chuỗi peptide, tạo thành lõi kỵ nước ổn định, trong khi các gốc tích điện (Glu1, Glam2, Arg5, Arg6, Asp8) được phân bố trên bề mặt. Cấu trúc "kỵ nước bên trong, ưa nước bên ngoài" này cho phép liên kết mục tiêu thông qua các cơ chế sau:
Tính bổ sung điện tích: Vùng đầu cực N{0}} của SNAP-25 có nhiều dư lượng kiềm (chẳng hạn như Lys và Arg), trong khi các dư lượng axit trên bề mặt LC553 (Glu1, Glam2, Asp8) tăng cường liên kết thông qua tương tác tĩnh điện;

Neo kỵ nước: Chuỗi bên kỵ nước của Met3 và Ala7 được đưa vào túi kỵ nước của SNAP-25 để ổn định cấu trúc của phức hợp;

Bù entropy phù hợp: Việc điều chỉnh động của vùng cuộn ngẫu nhiên có thể làm giảm tổn thất entropy trong quá trình liên kết và tăng năng lượng tự do liên kết.

Động lực hình dạng của LC553 không chỉ xác định khả năng liên kết của nó với SNAP-25 mà còn đạt được sự mở rộng chức năng bằng cách ảnh hưởng đến các đường truyền tín hiệu của tế bào. Ví dụ:
Cơ chế chống nhăn: Trong nguyên bào sợi của da,tiêm SNAP 8ức chế hình thành phức hợp SNARE, giảm giải phóng acetylcholine từ đó làm giảm tần suất co cơ và giảm độ sâu nếp nhăn 63,13%;

Cơ chế điều hòa miễn dịch: Trong các đại thực bào bị nhiễm Mycobacteria leprae, LC553 ổn định protein SNAP29, phục hồi phản ứng tổng hợp lysosome autophagosome và giảm 70% tải lượng vi khuẩn;

Cơ chế chống viêm: LC553 có thể liên kết cạnh tranh với tiểu đơn vị 7 của nAChR, ức chế chuyển vị hạt nhân NF - κ B do TNF - - gây ra và giảm bài tiết IL-6 và IL-8.

Hiệu ứng chéo này bắt nguồn từ sự điều chỉnh linh hoạt cấu trúc chuỗi peptide: trong liệu pháp chống nếp nhăn, LC553 chủ yếu thể hiện sự uốn cong ngẫu nhiên, làm giảm liên kết không{1}}đặc hiệu với các tế bào cơ; Trong điều hòa miễn dịch, việc nâng cao cấu hình góc - sẽ cải thiện khả năng nhận biết cụ thể của nó với các protein mục tiêu.

Là mục tiêu phân phối chính của LC553, chức năng rào cản của da chủ yếu là lớp sừng (SC). SC bao gồm các tế bào keratinocytes (gạch) và lipid nội bào (vữa), tạo thành một "cấu trúc tường gạch" dày đặc. Trong số đó, ma trận lipid chủ yếu bao gồm ceramide, cholesterol và axit béo tự do, và sự sắp xếp của chúng quyết định hiệu quả thâm nhập của chuỗi peptide.

Các thí nghiệm đã chỉ ra rằng trọng lượng phân tử (1075,16 Da) và tính ưa nước (logP=-2.1) của LC553 khiến cho việc xâm nhập trực tiếp vào SC trở nên khó khăn. Tuy nhiên, động lực hình dạng của nó mang lại khả năng vượt qua các rào cản:

Uốn ngẫu nhiên làm giảm rào cản năng lượng xuyên: Trong lớp lipid kép của SC, cấu trúc uốn ngẫu nhiên của LC553 có thể làm giảm năng lượng tương tác với các phân tử lipid, làm giảm hàng rào năng lượng xuyên từ 15 kcal/mol của peptide truyền thống xuống còn 8 kcal/mol;

Góc - thúc đẩy sự vận chuyển qua tế bào: Trong tế bào sừng, cấu trúc góc - của LC553 có thể được nhận ra bởi các protein vận chuyển trên màng tế bào và xâm nhập vào tế bào chất thông qua quá trình nhập bào.

Việc cung cấp LC553 ở các vùng niêm mạc như đường hô hấp và đường tiêu hóa phải đối mặt với những thách thức từ lớp chất nhầy. Chất nhầy bao gồm chất nhầy, lipid và globulin miễn dịch, tạo thành cấu trúc “bộ lọc” động với kích thước lỗ chân lông trong khoảng 10-1000 nm, có thể chặn hơn 90% hạt nano và thuốc peptide.
Sự hình thành của protein corona có nguồn gốc từ chất nhầy càng làm phức tạp thêm quá trình phân phối.

Khi các hạt nano LC553 tiếp xúc với chất nhầy, chất nhầy, globulin miễn dịch A (IgA) và protein bổ sung nhanh chóng hấp phụ trên bề mặt của các hạt, tạo thành "vỏ cứng" và "vỏ mềm". Trong số đó, vương miện cứng bao gồm các protein có ái lực cao, hình thành nhanh chóng và ổn định; Vương miện mềm bao gồm các protein có ái lực thấp, dễ phân ly. Thành phần và độ dày của vỏ protein ảnh hưởng trực tiếp đến khả năng thẩm thấu chất nhầy của hạt nano.

Tác dụng che chắn của mão cứng: Chất nhầy trong mão cứng có thể liên kết với LC553 thông qua liên kết hydro và tương tác kỵ nước, tạo thành một phức hợp ổn định ngăn chặn sự tương tác của nó với các tế bào đích;
Điều chỉnh động của vương miện mềm: IgA và protein bổ sung trong vương miện mềm có thể giải phóng LC553 thông qua quá trình thủy phân bằng enzyme hoặc thay đổi về hình dạng, khôi phục hoạt động của nó.

Các thí nghiệm đã chỉ ra rằng hệ số khuếch tán của hạt nano LC553 chưa biến tính trong chất nhầy chỉ là 0,1 × 10 ⁻⁷ cm 2/s, trong khi hệ số khuếch tán của hạt nano được phủ trước chất nhầy có thể tăng lên 1,2 × 10 ⁻⁷ cm 2/s, cho thấy rằng sự điều chỉnh động của vương miện protein là chìa khóa để vượt qua hàng rào chất nhầy.

Ngay cả khi LC553 thâm nhập thành công vào hàng rào da hoặc niêm mạc, nó vẫn cần phải vượt qua các rào cản vận chuyển nội bào. Con đường lysosome nội bào là con đường chính để tế bào hấp thu các chất ngoại sinh, nhưng môi trường axit (pH 4,5-5,0) và quá trình thủy phân bằng enzym của con đường này có thể làm suy giảm đáng kể LC553. Nghiên cứu đã chỉ ra rằng thời gian bán hủy của LC553 trong nội nhũ chỉ là 15 phút, trong khi ở lysosome thì thời gian bán hủy được rút ngắn xuống còn 5 phút. Để cải thiện hiệu quả phân phối, cần đạt được sự thoát khỏi nội tiết thông qua các chiến lược sau:

Chất mang nhạy cảm với PH: Các hạt nano được điều chế bằng chất đồng trùng hợp axit hydroxyacetic axit polyethylene glycol polylactic (PEG-PLGA) có thể phân ly trong môi trường axit của nội nhũ, giải phóngtiêm SNAP 8;
Sửa đổi peptide tổng hợp màng: peptide HA2 liên kết cộng hóa trị (có nguồn gốc từ virus cúm) với LC553 có thể thúc đẩy sự hợp nhất của các hạt nano với màng nội tiết, đạt được sự giải phóng nội dung; Hỗ trợ peptide thâm nhập tế bào (CPP): Sự kết hợp của peptide TAT (từ HIV-1) với LC553 tăng cường khả năng vận chuyển xuyên màng của nó, tăng tốc độ hấp thu tế bào lên gấp ba lần.

tiêm SNAP 8(Acetyl Octapeptide-3 Tiêm) là một sản phẩm chống lão hóa polypeptide mới và là phiên bản nâng cấp của thành phần chống lão hóa cổ điển Argireline (Acetyl Hexapeptide-8). Bằng cách thêm hai axit amin vào chuỗi peptide, hoạt động chống lão hóa-của nó được tăng cường đáng kể. Phương pháp này được áp dụng rộng rãi và mang lại hiệu quả vượt trội trong việc chống{11}}lão hóa da mặt và cải thiện kết cấu da. Với tác dụng nhẹ, độ an toàn cao và không có thời gian phục hồi rõ ràng, nó đã trở thành một liệu pháp chống lão hóa xâm lấn tối thiểu phổ biến. Cơ chế cốt lõi của nó là bắt chước đoạn N-terminal của protein SNAP-25, ức chế cạnh tranh sự hình thành phức hợp SNARE và giảm sự giải phóng chất dẫn truyền thần kinh acetylcholine.

Điều này giúp thư giãn-các cơ mặt bị co rút, cải thiện cơ bản các nếp nhăn động và đồng thời điều chỉnh kết cấu da để đạt được tác dụng kép là chống-lão hóa và trẻ hóa da.

Về mặt chống-lão hóa trên khuôn mặt, sản phẩm chủ yếu nhắm vào các nếp nhăn động, bao gồm đường trán, đường nhăn, vết chân chim và nếp nhăn ở mũi do biểu hiện thường xuyên trên khuôn mặt. Các nghiên cứu lâm sàng cho thấy sản phẩm có thể làm giảm độ sâu của nếp nhăn tới 63% với kết quả tự nhiên và không-cứng nhắc, tránh bị tê mặt và biểu cảm không tự nhiên thường gây ra do tiêm độc tố botulinum truyền thống.

Nó nhanh chóng làm dịu các cơ mặt căng thẳng sau khi tiêm và làm giảm sự hình thành các nếp nhăn động. Đồng thời, thúc đẩy quá trình tổng hợp collagen ở lớp hạ bì, tăng cường độ đàn hồi cho da và làm mờ dần các nếp nhăn tĩnh đã hình thành. Việc tiêm dài hạn-thường xuyên có thể làm chậm quá trình nhăn sâu và duy trì trạng thái trẻ trung trên khuôn mặt. Để cải thiện kết cấu da, sản phẩm điều chỉnh quá trình trao đổi chất của da, giảm tình trạng thô ráp, xỉn màu và lỗ chân lông to, duy trì sự cân bằng nước-dầu trên da và tăng cường khả năng khóa nước-của da để làm cho làn da trở nên mỏng manh và tươi sáng. Thành phần dịu nhẹ thân thiện với làn da nhạy cảm và không gây kích ứng rõ rệt sau khi tiêm.

Nó còn phục hồi hàng rào bảo vệ da và giảm tác hại từ môi trường bên ngoài cho da, đặc biệt phù hợp với những người có tình trạng da kém do thức khuya và tia cực tím. Ngoài ra, nó có thể được kết hợp với liệu pháp mesotherapy, tần số vô tuyến và các dự án thẩm mỹ khác để tối ưu hóa hơn nữa hiệu quả chống lão hóa{1}}và đạt được mục tiêu kép là làm mờ nếp nhăn và trẻ hóa da. Không cần thời gian hồi phục lâu sau khi tiêm, không ảnh hưởng đến cuộc sống và công việc hàng ngày, đáp ứng tốt nhu cầu chống-lão hóa của con người hiện đại. Liều tiêm thông thường là 0,33–1 mg mỗi vị trí, được điều chỉnh tùy theo tình trạng nếp nhăn trên khuôn mặt. Quá trình điều trị bao gồm 1–2 mũi tiêm mỗi tuần trong 12 tuần, mang lại hiệu quả chống lão hóa và làm mịn da ổn định.

Dược động học của sản phẩm bao gồm bốn quá trình cốt lõi: hấp thu, phân phối, chuyển hóa và bài tiết. Là một hợp chất octapeptide có trọng lượng phân tử lớn (~ 1075,16 Da) và tính ưa nước mạnh, nó thể hiện các đặc tính in vivo điển hình của thuốc polypeptide. Mặc dù nghiên cứu hiện tại chủ yếu được suy ra từ các polypeptide tương tự, kết hợp với dữ liệu ứng dụng lâm sàng, các đặc tính dược động học cơ bản của nó đã được làm rõ, tạo cơ sở cho việc quản lý lâm sàng hợp lý.

Hấp thụ: Sản phẩm được sử dụng thông qua vi tiêm dưới da vào mô dưới da bề mặt xung quanh cơ mặt mục tiêu. Nó có thể được hấp thụ nhanh chóng bởi các mô địa phương với sinh khả dụng cao hơn so với các công thức bôi tại chỗ.

Nồng độ hiệu quả tại mô tại chỗ đạt được trong vòng 1–2 giờ sau khi tiêm và nồng độ đỉnh trong huyết tương xuất hiện sau 4–6 giờ. Tỷ lệ hấp thu tương quan thuận với liều tiêm: liều thấp (50 ug/vị trí) cho thấy sự hấp thu nhẹ nhàng, trong khi liều cao (100 ug/vị trí) có tốc độ hấp thu nhanh hơn một chút, không có sự tăng đột biến nồng độ trong huyết tương, đảm bảo độ an toàn cao. Do trọng lượng phân tử lớn, nó không thể dễ dàng thâm nhập vào lớp sừng còn nguyên vẹn, khiến việc tiêm vi mô dưới da trở thành con đường sử dụng hiệu quả chính để tránh sự hấp thu không đủ của ứng dụng tại chỗ.

Phân bổ: Sau khi tiêm, LC553 được phân bố chủ yếu ở các mô da và cơ xung quanh vị trí tiêm với sự phân bố toàn thân hạn chế và thể tích phân bố nhỏ. Nó hầu như không vượt qua được hàng rào máu-não và hàng rào nhau thai mà không có sự tích lũy toàn thân rõ ràng.

Trao đổi chất: Nó chủ yếu bị phân hủy bởi peptidase và protease trong các mô địa phương trong một quá trình trao đổi chất nhanh chóng. Các chất chuyển hóa chính là các mảnh axit amin, có thể được cơ thể hấp thụ và sử dụng thêm mà không tạo ra các chất chuyển hóa độc hại.

Việc biến đổi acetyl hóa đầu N- của nó cho phép nó chống lại sự phân hủy của aminopeptidase ở một mức độ nhất định và kéo dài thời gian tác dụng cục bộ. Toàn bộ thời gian bán thải-của nó dao động từ vài phút đến vài giờ, phù hợp với các loại thuốc polypeptide tương tự và cần phải tiêm lặp lại thường xuyên để duy trì hiệu quả.

bài tiết: Các mảnh axit amin được tạo ra trong quá trình trao đổi chất chủ yếu được bài tiết qua thận qua nước tiểu, với một lượng nhỏ được đào thải qua mật vào đường ruột. Không có rối loạn bài tiết rõ ràng được quan sát thấy. Không cần điều chỉnh liều đối với người có chức năng thận bình thường và không có bằng chứng về sự tích lũy trong cơ thể. Tiêm thường xuyên và lâu dài sẽ không làm tăng gánh nặng bài tiết.