Fluconazol dạng lỏng

1. Liên kết đặc hiệu với enzyme và phong tỏa chức năng
Cơ chế hoạt động cốt lõi của Fluconazole là thông qua vòng triazole được fluoride hóa trong cấu trúc phân tử của nó, vòng này liên kết đặc biệt với 14 - lanosterol demethylase trong họ enzyme cytochrome P450 của nấm. Enzyme này là enzyme giới hạn tốc độ quan trọng trong quá trình sinh tổng hợp ergosterol, chịu trách nhiệm chuyển đổi lanosterol thành tiền chất của ergosterol -14 demethylated lanosterol. Nguyên tử nitơ của Fluconazol tạo thành liên kết phối hợp với nguyên tử sắt trong trung tâm hoạt động của enzyme, gây ra sự thay đổi về hình dạng của enzyme và ngăn chặn sự kích hoạt oxy và khử methyl của lanosterol. Quá trình này trực tiếp dẫn đến sự gián đoạn quá trình tổng hợp ergosterol, thành phần chính của màng sinh học nấm. Sự vắng mặt của nó có thể gây ra sự gia tăng đáng kể tính thấm của màng bioplast.

Ngoài ra, một số loại nấm (chẳng hạn như Candida krusei) thể hiện tính kháng vốn có với Fluconazole do chúng thiếu 14 - demethylase tự nhiên hoặc do sự tồn tại của các con đường tổng hợp sterol thay thế. Cơ chế đề kháng của Candida auris liên quan đến tác dụng hiệp đồng của các đột biến ERG11 và sự biểu hiện quá mức của các bơm đẩy ngược (như CDR1, MDR1).

Ý nghĩa lâm sàng: Sự xuất hiện của các chủng-kháng thuốc đòi hỏi các bác sĩ lâm sàng phải điều chỉnh kế hoạch điều trị dựa trên kết quả xét nghiệm độ nhạy cảm với thuốc, chẳng hạn như chuyển sang dùng amphotericin B hoặc 5-fluorocytosine để điều trị nhiễm trùng Cryptococcus kháng fluconazole.

Quan sát thực nghiệm: Kính hiển vi điện tử truyền qua cho thấy màng sinh học bị nhăn và vỡ đáng kể của Candida albicans được điều trị bằng Fluconazol, với hàm lượng tế bào chất xâm nhập vào chất nền ngoại bào. Các thí nghiệm nhuộm huỳnh quang đã xác nhận rằng tính thấm của màng sinh học với propidium iodide (PI) tăng đáng kể sau khi xử lý bằng thuốc, cho thấy tính toàn vẹn của màng bị phá vỡ.

2. Ý nghĩa lâm sàng
Tổn thương màng bioplast là cơ sở cho tác dụng diệt khuẩn nhanh chóng của Fluconazol. Trong mô hình động vật, có thể quan sát thấy sự giảm hơn 90% đơn vị hình thành khuẩn lạc nấm (CFU) trong vòng 2 giờ sau khi dùng, điều này liên quan trực tiếp đến sự thay đổi tính thấm của màng. Ngoài ra, các mẫu phân tử liên quan đến mầm bệnh (PAMP) như - glucan tiếp xúc do tổn thương màng tế bào có thể kích hoạt hệ thống miễn dịch của vật chủ và nâng cao hiệu quả tiêu diệt nấm.

HMG CoA reductase: Enzyme này là enzyme giới hạn tốc độ của con đường mevalonate, và sự ức chế của nó làm giảm việc cung cấp tiền chất tổng hợp sterol.

Squalene cyclooxygenase: tham gia vào quá trình chuyển đổi squalene thành lanosterol, hoạt động giảm của nó làm trầm trọng thêm sự cản trở quá trình tổng hợp ergosterol.
Nghiên cứu về chuyển hóa: Thông qua phân tích sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS), người ta phát hiện ra rằng các sản phẩm trung gian như lanosterol và 14 methyl lanosterol tích lũy trong các tế bào sinh học Candida albicans được xử lý bằng Fluconazole, trong khi mức ergosterol và các dẫn xuất của nó giảm đáng kể. Đặc tính trao đổi chất này rất phù hợp với cơ chế tác dụng của thuốc.

2. Kích hoạt đường dẫn tín hiệu toàn vẹn của thành tế bào
Tổn thương thành tế bào nhựa sinh học kích hoạt đường dẫn tín hiệu về tính toàn vẹn của thành tế bào sinh học (CWI) của nấm, kích hoạt các phản ứng xếp tầng protein kinase C (PKC) và Mitogen kích hoạt protein kinase (MAPK) để tạo ra biểu hiện của các gen liên quan đến sửa chữa thành tế bào sinh học như FKS1 và CHS3. Tuy nhiên, dưới sự hiện diện liên tục của Fluconazole, việc kích hoạt quá mức con đường CWI có thể dẫn đến tăng căng thẳng oxy hóa nội bào, làm trầm trọng thêm tổn thương sinh khối.

Tác dụng hiệp đồng của liệu pháp phối hợp: Các nghiên cứu tiền lâm sàng đã chỉ ra rằng sự kết hợp giữa Fluconazol và echinocandin (như caspofungin) có thể tạo ra tác dụng hiệp đồng kháng nấm. Chất trước phá hủy màng bioplast, trong khi chất sau ức chế sự tổng hợp - glucan, dẫn đến sự sụp đổ của phức hợp màng vách bioplast và cải thiện đáng kể hiệu quả diệt khuẩn.

Điều chỉnh bài tiết cytokine: Trong các thí nghiệm in vitro, Fluconazole có thể kích thích bạch cầu đơn nhân của người tiết ra-các cytokine gây viêm như TNF - và IL-1, đồng thời ức chế sự biểu hiện của yếu tố chống viêm IL-10, từ đó tăng cường khả năng thanh thải miễn dịch.

2. Bằng chứng miễn dịch lâm sàng
Ở bệnh nhân AIDS bị viêm màng não do cryptococcus,Fluconazol dạng lỏngĐiều trị duy trì có thể làm giảm đáng kể tỷ lệ tái phát, một phần là do thuốc điều hòa chức năng miễn dịch của vật chủ. Nghiên cứu đã chỉ ra rằng những bệnh nhân dùng thuốc lâu dài- có số lượng tế bào CD4+T trong máu ngoại vi ổn định và mức độ bài tiết interferon - (IFN - ) tăng cao. Ngoài ra, Fluconazol có thể làm giảm quá trình tổng hợp polysaccharide trong viên nang Cryptococcus và làm giảm khả năng chống thực bào của chúng.